醬油中氨基酸態(tài)氮含量的測定是什么?
食品中的氨基酸組成十分復(fù)雜,在一般的常規(guī)檢驗中,多測定食品中氨基酸的總量,即氨基酸態(tài)氮的總量,通常采用堿滴定法進行簡易測定。
氨基酸含有羧基和氨基,利用氨基酸的兩性作用,加入甲醛固定氨基的堿性,使羧基顯示出酸性,用氫氧化鈉標準溶液滴定后進行定量,用酸度計測定終點。
蛋白質(zhì)是一類含氮的高分子化合物,基本組成單位是氨基酸。參加蛋白質(zhì)合成的氨基酸共有二十多種,其中有9種(賴氨酸、色氨酸、苯丙氨酸、亮氨酸、異亮氨酸、蘇氨酸、組氨酸、蛋氨酸和緬氨酸)人體自身不能合成,必須由食物中供給。
否則人體就不能維持正常代謝的進行,稱為必需氨基酸。蛋白質(zhì)是生命的基礎(chǔ),生命現(xiàn)象是通過蛋白質(zhì)來體現(xiàn)的。蛋白質(zhì)是人體組織細胞的重要組成部分,人體重量的18%由蛋白質(zhì)構(gòu)成。
試驗:?
準確吸取醬油5.0ml置于100ml容量瓶中,加水稀釋至刻度后搖勻吸取20.0ml置于100ml燒杯中,加水60ml,插入酸度計的指示電極作為參比電極。
開動磁力攪拌器(若是冬季需加熱到二十攝氏度左右),再用0.05mol/LNaOH標準溶液滴定酸度計指示Ph-8.2,記錄用去氫氧化鈉標準使用液的體積(ml)(按總酸計算公式可以計算出醬油的總算含量)。
向上述溶液中準確加入甲醛溶液10ml,搖勻,繼續(xù)用0.05m01/LNaOH標準溶液滴定滴定至Ph-9.2,記錄用去氫氧化鈉標準使用液的體積(ml),供計算氨基酸態(tài)氮含量用。
醬油中的氨基酸態(tài)氮是氨基酸含量的特征指標,含量越高醬油的鮮味越強,質(zhì)量越好。醬油分兩種:
1、釀造醬油(Fermented soy sauce):以大豆和/或脫脂大豆、小麥和/或麩皮為原料,經(jīng)微生物發(fā)酵制成的具有特殊色、香、味的液體調(diào)味品。按GB18186-2000要求其理化指標應(yīng)符合規(guī)定。
2、配制醬油(Blended soy sauce)以釀造醬油為主體,與酸水解植物蛋白調(diào)味液、食品添加劑等配制而成的液體調(diào)味品。按SB10336-2000(國家國內(nèi)貿(mào)易局行業(yè)標準)要求其理化指標應(yīng)符合規(guī)定。
醬油中氨基酸態(tài)氮含量的測定
醬油測的應(yīng)該是氨基態(tài)氮的含量吧。方法如下:
1 校正PH計。
2 吸取試樣A毫升(氨基態(tài)氮的含量為1~5mg)于燒杯中,加5滴30%過氧化氫.將燒杯置于電磁攪拌器上,電極插入燒杯內(nèi)試樣中適當位置。如需要加適量蒸餾水。
3 開動電磁攪拌器,先用0.1mol/L氫氧化鈉溶液慢慢中和試樣中的有機酸。當pH達到7.5左右時,再用0.05mol/L氫氧化鈉溶液調(diào)至pH8.1,并保持1min不變。然后慢慢加入10~15mL中性甲醛溶液(量取200mL甲醛溶液于400mL燒杯中,置于電磁攪拌器上, 邊攪拌邊用0.05mol/L氫氧化鈉溶液調(diào)至pH8.1).1min后用0.05mol/L氫氧化鈉標準滴定溶液滴定至pH8.1.記錄消耗0.05mol/L氫氧化鈉標準滴定溶液的毫升數(shù)。
4 結(jié)果表示 測定結(jié)果表示見公式:
c·V·K×14
X = ———————-×100
m
式中:X–每100g(或100mL)試樣中氨基態(tài)氮的毫克數(shù),mg/100g(或mg/100mL);
c–氫氧化鈉標準滴定溶液的濃度,mol/L;
V–加入中性甲醛溶液后,滴定試樣消耗0.05mol/L氫氧化鈉標準滴定溶液的體積,mL;
m–試樣的質(zhì)量,g(或體積mL);
K–稀釋倍數(shù); 14–1 mL 1N氫氧化鈉標準滴定溶液相當于氮的毫克數(shù)。
用甲醛法測定醬油中氨基酸態(tài)氮的操作方法
醬油測的應(yīng)該是氨基態(tài)氮的含量吧。方法如下:
1 校正PH計。
2 吸取試樣5ml于容量瓶中,定容100ml。
3 吸取稀釋液20ml于燒杯瓶中,將燒杯置于電磁攪拌器上,電極插入燒杯內(nèi)試樣中適當位置。
4 開動電磁攪拌器,先用0.1mol/L氫氧化鈉溶液慢慢中和試樣中的有機酸,當pH達到8.2左 右時,記錄消耗0.1mol/L氫氧化鈉標準滴定溶液的毫升數(shù)。然后慢慢加入10mL中性甲醛溶液,至PH值穩(wěn)定,再用0.1mol/L氫氧化鈉溶液調(diào)至pH9.2,并保持1min不變。記錄消耗0.1mol/L氫氧化鈉標準滴定溶液的毫升數(shù)。
4 結(jié)果表示 測定結(jié)果表示見公式:
c·V·K×14
X = ———————-×100
m
式中:X–每100g(或100mL)試樣中氨基態(tài)氮的毫克數(shù),mg/100g(或mg/100mL);
c–氫氧化鈉標準滴定溶液的濃度,mol/L;
V–加入中性甲醛溶液后,滴定試樣消耗0.1mol/L氫氧化鈉標準滴定溶液的體積,mL;
m–試樣的質(zhì)量,g(或體積mL);
K–稀釋倍數(shù);
14–1 mL 1N氫氧化鈉標準滴定溶液相當于氮的毫克數(shù)。
電位法測定醬油中氨基酸態(tài)氮實驗中,為什么要先滴定至ph8.2,再加甲醛滴定至p
PH=7.0是溶液中游離氫離子與氫氧化鈉標準溶液完全反應(yīng)后的PH值,即有效酸度。
PH=8.2是溶液中除有效酸度以外的物質(zhì)與氫氧化鈉標準溶液完全反應(yīng)后的PH值,即總酸度。
PH=9.2是溶液中氨基態(tài)氮中的羧基與氫氧化鈉標準溶液完全反應(yīng)后的PH值。
本實驗用的是PH為8.2和9.2數(shù)據(jù)。由于醬油還含有總酸度,為了測定有效酸度,需要先獲取總酸度。用PH=8.2時氫氧化鈉消耗的體積(對應(yīng)總酸度)與PH=9.2時氫氧化鈉消耗的體積的差,可計算出樣品中氨基態(tài)氮含量。
擴展資料:
氨基態(tài)氮的測定是通過測定氨基酸羧基的酸度來測定樣品中氨基態(tài)氮的含量。而氨甚酸在一般情況下呈中性,故需加入甲醛與氨基結(jié)合,固定氨基的堿性,使羧基顯示出酸性。
氨基酸有氨基及羧基兩性基團,它們相互作用形成中性內(nèi)鹽,利用氨基酸的兩性作用,加入甲醛以固定氨基的堿性,使羧基顯示出來酸性,用氫氧化鈉標準溶液滴定后定量,根據(jù)酸度計指示PH值,控制終點
為什么要測定醬油中氨基酸的含量?
醬油中的氨基酸來自于釀造原料中的蛋白質(zhì)類物質(zhì)。
一般來說,醬油中的鮮香味就來自氨基酸。醬油中的氨基酸含量越高,調(diào)味時鮮香味越足。所以,醬油中的氨基酸含量是衡量醬油質(zhì)量最重要的指標。我國醬油質(zhì)量標準規(guī)定,醬油中的氨基酸態(tài)氮含量不得低于0.2g/100ml,就是為了保證醬油調(diào)味時的鮮香味。
醬油中氨基酸態(tài)氮的含量測定的國標是什么
醬油中氨基酸態(tài)氮的含量測定的國標:
《GB 18186-2000釀造醬油》規(guī)定氨基酸態(tài)氮的理化標準規(guī)定和試驗方法;
《GB/T 5009.39-2003醬油衛(wèi)生標準的分析方法》規(guī)定氨基酸態(tài)氮的理化檢驗的具體分析方法,較為詳細。