氨基酸的分離分析方法常有有哪些
如果是兩個氨基酸的保留時間距離太近,那么只能調(diào)整液相條件了。
比如調(diào)整流動相比例,或者是梯度比例,把兩個氨基酸拉開。
也可以適當調(diào)整衍生程序。
雖然衍生程序不會對氨基酸的保留時間有影響,不過會對它的信號產(chǎn)生影響。
如果這兩種氨基酸的峰高有所下降,或許分離度也可以達到要求。
還有就是注意峰型。
衍生化程序很容易損壞色譜柱,超高效色譜的壓力又高,色譜柱很容易損毀。
如果峰型不好,建議用純乙腈低流速反沖色譜柱。
或者是更換新色譜柱。
氨基酸是從哪里提取
1、提取法:指蛋白質(zhì)或以含有蛋白質(zhì)的物料為原料,經(jīng)酸、堿、或酶水解以后提純氨基酸的方法。早期提取法是建立在溶劑抽提、等電點結(jié)晶和沉淀劑分離的基礎(chǔ)上。隨著離子交換樹脂的應用,使氨基酸的分離更為容易,簡化了提煉工序,縮短了操作時間,提高了氨基酸收率。提取法的優(yōu)點是原料來源豐富,投產(chǎn)比較容易,但產(chǎn)量低,成本高,三廢較嚴重。
提取與分離是氨基酸生產(chǎn)的基本技術(shù)。無論何種方法均有分離純化工序。即提純也是提高氨基酸質(zhì)量的關(guān)鍵步驟之一。目前仍有一定數(shù)量品種如半胱氨酸、酪氨酸、羥脯氨酸、組氨酸、亮氨酸用提取方法生產(chǎn),且占主要的地位。
2、氨基酸生產(chǎn)中普遍采用微生物發(fā)酵法,菌體留存于發(fā)酵液中,成為發(fā)酵廢母液有機污染物的一部分,菌體蛋白含有豐富的蛋白質(zhì)和其他營養(yǎng)物質(zhì)。氨基酸提取工藝不同,廢母液中的成分也不同。
擴展資料:
氨基酸的結(jié)構(gòu)特點:
1、每種氨基酸分子中至少有一個氨基和一個羧基。
2、都有一個氨基和一個羧基鏈接在同一個碳原子上。
3、各種氨基酸之間的區(qū)別在于r基(側(cè)鏈基團)的不同。
氨基酸是羧酸碳原子上的氫原子被氨基取代后的化合物,氨基酸分子中含有氨基和羧基兩種官能團。與羥基酸類似,氨基酸可按照氨基連在碳鏈上的不同位置而分為α-,β-,γ-…w-氨基酸,但經(jīng)蛋白質(zhì)水解后得到的氨基酸都是α-氨基酸,而且僅有二十幾種,他們是構(gòu)成蛋白質(zhì)的基本單位。
參考資料來源:
百度百科-氨基酸
有機化學中氨基酸的分離和鑒定的思路是什么呀?
1.基礎(chǔ)知識(若學過氨基酸的酸堿性,可直接pass)
氨基酸分子中的氨基是堿性的,而羧基則是酸性的。但它們的酸堿解離常數(shù)比一般的羧基-COOH和氨基-NH2低。
例如:甘氨酸:Ka=1.6×10-10,Kb=2.5×10-12
大多數(shù)的羧酸:Ka=10-5
這說明氨基酸在一般情況下不是以游離態(tài)的羧基和氨基存在的,而是以內(nèi)鹽的形式存在(內(nèi)鹽:偶極離子),H3N+ _CHRCOO – 。
可以把測得氨基酸的Ka值看成是氨基酸中銨離子的酸度:Ka~NH3+
把測得氨基酸的Kb值看成是氨基酸中羧酸根離子的堿度:Kb~COO-
氨基酸即帶有氨基,又帶有羧基,所以是兩性化合物,既能和酸反應,也能和堿反應。在強酸性溶液中,以正離子形式存在,在強堿性溶液中以負離子形式存在。
若能水解的氨基個數(shù)少于能水解的羧基個數(shù)(溶液呈酸性),則為酸性氨基酸,包括:天冬氨酸,谷氨酸,天冬酰胺,谷氨酰胺四種;若能水解的氨基個數(shù)多于能水解的羧基個數(shù)(溶液呈堿性),則為堿性氨基酸,包括:賴氨酸,精氨酸,組氨酸,脯氨酸四種。
2.氨基酸的電泳
當氨基酸的溶液置于電場中時,所發(fā)生的變化取決于溶液的酸堿度。
在相當堿性的溶液中,陰離子Ⅱ超過陽離子Ⅲ,因此氨基酸向陽極遷移;在相當酸性的溶液中,陽離子Ⅲ是過量的,因此,氨基酸向陰極遷移,如果Ⅱ和Ⅲ完全相等,那么,沒有凈遷移。在這樣的條件下,任何一個分子作為正離子和作為負離子存在的機會是完全相等的,向一個電極方向的任何微小移動,馬上就被一個相等的朝另一個電極的方向移動所抵消。當一個特定的氨基酸在電場的影響下不發(fā)生遷移時,這個氨基酸所在溶液的氫離子濃度叫做氨基酸的等電點,通常pI表示。凈電荷為零的氨基酸所在的溶液的pH值為pI。
氨基酸的pI值主要由其羧酸和氨基的電離常數(shù)來決定的,假如以pK1代表-COOH 基的電離常數(shù),pK2代表-NH3+基團電離常數(shù),則pI和它們的關(guān)系可用下式表示:見 圖片
在等電點時,氨基酸的溶解度最小,因而用調(diào)節(jié)等電點的方法可以從氨基酸的混合物中分離出某些氨基酸。
中性氨基酸pI =5.5~6.3 ,酸性氨基酸pI =2.8~3.2 ,堿性氨基酸pI =7.6~10.6。一般來說,氨基酸含氨基,pI值較高,含羧基多者pH值較低 。當氨基酸中氨基多于一個時,當凈電荷為零時,氨基酸溶液堿性強于氨基與羧基相等的溶液的pH值,故溶液pH值較高,pI值高。同理,氨基酸羧基多時,pI值較值小。
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這一部分是比較難理解,不清楚的地方還可以再問我。
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氨基酸解離步驟是什么?
氨基酸解離的過程如下:
兩性離子溶于水時,其正負離子都能解離,但解離度與溶液的pH知有關(guān),向該溶液中加入酸時,其兩性離子的-COO-負離子在電場中向負極移動,加入堿性時,其兩性離子的-NH3+正離子釋放出質(zhì)子,其自身成為負離子,在電場中向正極移動,這一過程稱兩性解離。
其原理是:所有氨基酸都含有堿性的氨基(或亞氨基)和酸性的羧基,因而能在酸性溶液中與質(zhì)子結(jié)合而呈陽離子,也能在堿性溶液中與OH結(jié)合,失去質(zhì)子而變成陰離子。
擴展資料:
氨基酸解離的兩種常見形式:
1、鹽析主要是利用不同蛋白質(zhì)在不同濃度的中性鹽溶液中的溶解度不同,向蛋白質(zhì)溶液加入中性鹽,破壞水化膜和電荷兩個穩(wěn)定因素,使蛋白質(zhì)沉淀。
2、透析主要是利用僅有小分子化合物能通透半透膜,使大分子蛋白質(zhì)與小分子化合物分離,達到除鹽目的。凝膠過濾柱內(nèi)填充帶小孔的葡聚糖顆粒,可將蛋白質(zhì)按分子量大小不同而分離。
參考資料來源:百度百科:氨基酸兩性解離性