tris-甘氨酸如何配置電泳緩沖液?

Tris-甘氨酸電泳緩沖液:30.3gTris,188g甘氨酸,10gSDS

直接配置成 5X電泳緩沖液：15.1g Tris 94.0g Gly 5.0g SDS

變性電泳中為什么加甘氨酸

sds-page中樣品液和濃縮膠選tris/hcl緩沖液，電極液選tris/甘氨酸，電泳開始后，hcl解離成氯離子，甘氨酸解離出少量的甘氨酸根離子。蛋白質帶負電荷，因此一起向正極移動，其中氯離子最快，甘氨酸根離子最慢，蛋白居中。電泳開始時氯離子泳動率最大，超過蛋白，因此在后面形成低電導區，而電場強度與低電導區成反比，因而產生較高的電場強度，使蛋白和甘氨酸根離子迅速移動，形成以穩定的界面，使蛋白聚集在移動界面附近，濃縮成一中間層。

含8mol/尿素的tris―甘氨酸如何配置

1mol/l甘氨酸的配制方法方法如下：冰乙酸的濃度是17mol/L,假設要配置1000毫升1mol/L的醋酸，17*V=1*1000，V=58.8ml，將58.8毫升冰乙酸和941.2毫升水混勻即可。乙酸鉀又稱醋酸鉀，分子式是C2H3KO2，分子量為98.1423，該品用作脫水劑、纖維處理劑和分析試劑。無色結晶或白色結晶性粉末。易吸濕。易溶于水和乙醇（1g產品溶于0.5ml冷水、0.2ml沸水、2.9ml乙醇）。水溶液對石蕊呈堿性反應。0.1mol/L水溶液的pH為9.7。相對密度1.57。熔點292℃。低毒，半數致死量（大鼠，經口）3250mg/kg，加熱分解時其中間產物為草酸鉀，最終產物為碳酸鉀。

tris是什么試劑？

三羥甲基氨基甲烷試劑，三羥甲基氨基甲烷（Tris）是一種應用非常廣泛的有機試劑，它的有效緩沖范圍在pH7.0到9.2之間。它及其衍生物被廣泛應用于生物化學和分子生物學實驗中的緩沖液的制備，可用于制作藥物、有機合成、生物緩沖劑等。

其中在生化實驗中，許多蛋白質及核酸相關的實驗都需要用Tris作為生物緩沖劑。它甚至有超過磷酸鹽緩沖液的趨勢，因為它有好的緩沖能力、毒性低、對生物反應的干擾極低，而且純度很高。有超過磷酸鹽的趨勢，如在SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳中都已開始實驗TRIS緩沖液，很少再用磷酸鹽。

TRIS（三羥甲基氨基甲烷）的應用

① 在電泳緩沖液中同甘氨酸構成緩沖體系穩定P值；

② 在凝膠中使用TRIS-HCL緩沖體系穩定PH值；

③ 被廣泛用作核酸和蛋白質的溶劑；

④ TRIS緩沖液的低離子強度特點還可用于線蟲的中間纖維的形成；

⑤ 在TRIS鹽酸緩沖液中加入EDTA制成“TE緩沖液”，可用于DNA的穩定和儲存；

⑥ 將調節PH值的酸溶液換成乙酸，獲得“TAE緩沖液”，換成硼酸可獲得TBE緩沖液。這兩種溶液常用于核酸電泳實中。